细菌外膜囊泡肿瘤疫苗对胰腺癌小鼠肿瘤细胞增殖和CD8+T细胞浸润的影响
目的探讨细菌外膜囊泡(OMV)肿瘤疫苗对胰腺癌小鼠肿瘤细胞增殖和CD8+T细胞浸润的影响。方法采用实验研究方法。利用卵清蛋白(ova)慢病毒载体质粒plv-ef1a-hluc-p2a-mneongreen-cmv-ova-3xflag-p2a-puro构建小鼠胰腺癌pan02 ova。细胞.从大肠杆菌和标签化抗原肽spytag ova中制备了含有clya catchers OMV(CC OMV)的OMV。肿瘤疫苗.大学使用OMVs肿瘤疫苗刺激小鼠CD8+T细胞的产生,体外细胞杀伤试验(OMVs肿瘤疫苗刺激T 细胞组和对照T 细胞组),采用小鼠皮下胰腺癌成瘤模型(OMVs肿瘤疫苗组和对照组)和免疫组织化学染色,分析OMVs肿瘤疫苗抑制胰腺癌细胞增殖和刺激CD8+T细胞浸润的作用。结果指标:(1)小鼠胰腺癌pan02 ova细胞的鉴定。(2) CC OMV的形态学观察。(3) OMVs肿瘤疫苗特异性T细胞对小鼠胰腺癌pan02 ova细胞增殖的抑制作用。(4) OMVs肿瘤疫苗对小鼠胰腺癌的抑制作用。(5) OMVs肿瘤疫苗刺激小鼠胰腺癌组织中CD8+T细胞的浸润。正态分布的测量数据以XS表示, 组之间的比较采用t检验。计数数据以绝对数或百分比表示。结果(1)小鼠胰腺癌pan02 ova细胞的鉴定。激光共聚焦检测结果表明,小鼠感染载体plv-ef1a-hluc-p2a-mneongreen-cmv-ova-3xflag-p2a-puro的胰腺癌pan02 ova细胞表达mneongreen绿色荧光。流式细胞仪检测结果表明,pan02 ova细胞中flag蛋白的表达率为90.7%。(2) CC OMV的形态学观察。透射电镜结果表明,CC-OMV呈均匀球形,直径小于nm。(3) OMVs肿瘤疫苗特异性T细胞对小鼠胰腺癌pan02 ova细胞增殖的抑制作用。细胞毒性试验结果表明,OMVs肿瘤疫苗刺激的胰腺癌pan02 ova在t-细胞组小鼠中的nm吸光度为0.410.12,在对照t-细胞组小鼠中的nm吸光度为1.050.15。与 两组相比,差异具有统计学意义(t=9.54,P<0.05)。(4) OMVs肿瘤疫苗对小鼠胰腺癌的抑制作用。OMVs ICRC小鼠背部皮下肿瘤组织质量为(8110)g,对照组为(15317)g。与 两组相比,差异有统计学意义(t=8.26,P<0.05)。(5) OMVs肿瘤疫苗刺激小鼠胰腺癌组织中CD8+T细胞的浸润。免疫组化染色显示,OMVs肿瘤疫苗组小鼠背部皮下肿瘤组织中CD8+T细胞数量为(28.73.5),对照组为(9.31.5)。与 两组相比,差异有统计学意义(t=8.74,P<0.05)。结论细菌性OMVs肿瘤疫苗能促进可抑制胰腺癌小鼠肿瘤细胞增殖,增加肿瘤组织CD8+T细胞浸润数。