为了从野生春兰根中分离筛选有益的内生真菌，并将其应用于提高春兰对环境的适应性和抗病性，本研究从春兰根段分离培养内生真菌，结合真菌和分子生物学技术的形态特征对其进行分类鉴定，将获得的真菌与三种兰科植物病原菌进行培养，筛选拮抗剂，然后重新筛选。从春兰根段分离出11株真菌。经鉴定，兰科菌根真菌美孢胶膜菌（Tulasnella　calospora）共有9株常见菌株，一株是产生红色素的蓝藻（Talaromycessp），一株是木霉（Chaetomium·sp）。11株真菌对整叶菌核病（Sclerotium　rolfsii）无明显抑制作用，美孢胶膜菌对胶孢炭疽菌（胶孢炭疽菌）和立枯丝核菌（Rhizoctonia　solani）9株抑制率较低，但分离菌株Cg2-10-11对胶孢炭疽菌和立枯丝核菌有明显抑制作用，篮式真菌Cg2-10-7对立枯病丝核菌的抑制率为（95.371.61）%，显著高于对球孢炭疽菌的抑制率（34.340.88）%。本研究结果表明，春兰根中广为认可的兰科共生真菌Meiblestan的拮抗效果较差，而分离鉴定的篮状真菌Cg2-10-7和木霉Cg2-10-11具有生防细菌开发潜力，可用于兰科植物的资源保护。