新型冠状病毒水貂变异株重组水泡性口炎病毒载体假病毒的拯救及鉴定
作者:王申; 王玮琦; 闫飞虎; 冯娜; 赵永坤; 王铁成; 高玉伟; 杨松涛; 夏咸柱
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为了拯救新型冠状病毒(SARSCoV-2)的水貂变种,水泡性口炎-病毒(VSV)载体假病毒)在假病毒进行了重组和鉴定。基于我们实验室构建的VSV反向遗传系统,SARSCoV-2的刺突蛋白(s)被用于全长cDNA克隆p3。1-vsvg-s-egfp是通过替换p3中的VSV糖蛋白(g)基因获得的。1-vsv-eGFP。P3。1-vsvg-Leban与四种分别表达VSV核蛋白n、磷蛋白P、聚合酶L和g的辅助质粒共转染,以绿色荧光标记保存重组假病毒vsvg-s-egfp。通过荧光显微镜、生长动力学曲线、RT-PCR、Western blot和透射电镜对重组假病毒进行鉴定。重组vsvg-s-egfp被成功拯救,并能在细胞中有效增殖。VSVG-s-egfp的最高生长滴度为106.8tcid50/ml。本研究保存的重组假病毒VSVG-s-egfp为SARS-CoV-2水貂变异株抗体筛查和疫苗评估提供了强有力的工具。